Gentechnik

© 2002-2007 Hans-Dieter Mallig  (hdm)
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(Prinzip der Genübertragung: Selektion der Bakterien mit Hybridplasmid [6])
 

Hybrid-Plasmid
 

Ampicillin-Platten
Auf den Platten mit Ampicillin wachsen nur Bakterien, die das Plasmid in Original- oder in Hybridform enthalten.

Tetracyclin-Platten
Auf den Platten mit Tetracyclin wachsen nur Bakterien, bei denen das Tetracyclin-Resistenz-Gen nicht verändert wurde. Bakterien mit einem fremden DNA-Fragment im Tetracyclin-Resistenz-Gen, Hybrid-Plasmide, können nicht wachsen. Solche Kolonien finden wir auf der Ampicillin-Platte  an den Stellen, an denen auf der Tetracyclin-Platte die entsprechenden Kolonien fehlen (Anklicken!! Markierung mit Kreuz.) 
Kolonien mit Hybrid-Plasmiden werden mit  sterilen Glas- oder Holzstäben abgekratzt und daraus reine Kulturen gezogen. Diese  werden nummeriert, in einer Genbank gesammelt und dann bezüglich des eingebauten Fragments  weiter untersucht.

Wir waren daran interessiert, ein Bakterium zu finden, das das Insulin-Gen mit seinem neuen Plasmid erhalten hat. Sobald wir diese Bakteriensorte in der Genbank aufgefunden haben, wird dieser Stamm zur Produkten von Insulin vermehrt.
 

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